Meristeminis/ląstelinis dauginimas 2 dalis

Pratęsiant Meristeminis/ląstelinis dauginimas 1 dalis

Kiekviena augalo rūšis turi savo specifinių reikalavimų, čia aprašoma cryptocoryne wendttii dauginimas, kurį Dr. Micheal Kane iš Floridos universiteto paskelbė. Geriausia ląstelinį dauginimą atlikti labaratorijoje, bet galima ir namuose.Galima lengvai ekperimentuoti įvairių elementų kiekius ir rasti geriausiai tinkamus kiekius savo norimam augalui padauginti .

Pirmasis etapas
    Pirmasis etapas susideda iš eksplanto parinkimo, dezinfekcijos ir patalpinimo pradiniame medžiagų mišinyje.

Eksplantas

Ekplantui puikiai tinka auglo ūgliai, reikalingas tik 2 cm gabalėlis.Ūgliai nuolat auga, todėl ši augalo vieta yra švaresnė nei kitos.Be to ūglio ląstelės nuolat dauginasi ir auga, kaip tik tai ko mum reikia.

Taip pat galima naudoti lapų vainiką, bet reikia nulupti visus senus lapus nuo šakniastiebio.Galima naudoti tik virš vandens augintus augalus, nes augalai auginti po vandeniu turi daug daugiau bakterijų ir jų pašalinimas yra sudėtingas nenužudant augalo.

Sterilizavimas
Reikia nuplauti eksplantą po tekančiu, vėsiu, bet nešaltu vandeniu.Negalima naudoti šilto vandens.Geriausia tai padaryti įdėjus augalą į indelį, uždengt tinkleliu ir tada pakišti po kranu 10 minučių.

Tada 5 sekundėm panardinti į 70% spiritą ir  15 minučių į 10% baliklio tirpalą.Galima šį laika padidinti iki 20 minučių, jei auginimo sąlygos nėra labai švarios.Po to praskalaujam steriliam vandenyje po 5 minutes 2 kartus.

 

Tai pati sudėtingiausia meristeminio dauginimo dalis.Šiek tiek per daug sterilizacijos ir eksplantas bus sunaikintas, jei sterilizacijos trūks eksplantą užpuls puvėsis ar grybelis.

Kai jau augalas švarus, sterilioj aplinkoje atkerpamas 1/2cm eksplanto ir patalpinamas į pradinį augimo tirpalą.Jei viskas atlikta sėkmingai, augti pradės maždaug po savaitės.

 

Jei viskas atrodis taip, reiškia ekspantas nebuvo švariai sterilizuotas.

 

 

 Pradinis augimo tirpalas

Sudėtis:

  • 1 litras distiliuoto vandens
  • Murashige & Skoog (MS) medžiagų mišinys
  • 6.5 gramai agaro.
  • 1 ml PPM(priemonė prieš mikrobus).PPM-tai ne „priemonė prieš mikrobus“ trumpinys
  • 1 ml-6-BENZYLAMINOPURINE tirpinio, geriau žinomo kaip BAP(en) ar BA(en). (1.0 mg/mL)
  • 30 gramų cukraus ar atitinkamas kiekis sacharozės
  • Keletas lašų valgomųjų dažų-tirpinio spalvai pakeisti.
  • Ph paruošimui iki 5.7 soda ar rūgštis(actas)

 Antrasis etapas-dauginimasis

Kai jau eksplantas pradeda augti, jis perkeliamas į kitą tirpalo mišinį, kuriame jis pradeda daugintis kaip pamišęs.

Per ateinančias kelias savaites augalas dauginasi naudodamas tirpinyje esančias medžiagas.Kas šešios savaitės, augalas perkeliamas į šviežią tirpinį.Jei augalų labai daug, jie padalinami i keletą skirtingų indelių.

 

Dauginimosi tirpalas  

Mišinys yra toks pat kaip ir pirmoje stadijoje, tik vietoj 1ml 6-BENZYLAMINOPURINE naudojami 4.5 ml.Augalus galima dauginti tol kol turėsit pakankamai jų atlikti sekantį etapą.

Trečias etapas-įsišaknijimas

Kai turit užtektinai augalų, jie yra perkeliami į tirpalą skatinantį šaknų augimą.Dauguma augalų gali sėkmingai įsišaknyti ir be augimo stabilizatorių.

Įsišaknijimui tirpalas naudojamas toks pat kaip ir pradiniam etape, tik 6-BENZYLAMINOPURINE nebenaudojamas.Po keletos savačių jo poveikis pranyks ir augalas pradės leisti šaknis.

Ketvirtasis etapas-aklimatizacija

Tai paskutinis etapas, kuriame augalai su šaknimas perkeliami iš sterilios aplinkos į tradicinius gruntus.

Aklimatizacija
Augalai su šaknimias yra išimami, ir nuplaunamas tirpalas kuriame jie augo.Trumpas įmerkimas į fungicidinį tirpalą ir augalas gali būti pasodintas į vatą ar į kitą augimo vietą.Augimo aplinka turi būti drėgna, bėgant laikui drėgmė vis mažinama(augalas tampa standesnis).Dažnai augalai greit suveši dėl užsilikusų augimo stabilizatorių.

Puslapis originalo kalba: http://kryptokoryne.aquaticscape.com/2010/03/29/cryptocoryne-tissue-culture-micropropagation-part-2/

 

 

  1. No comments yet.

  1. No trackbacks yet.

*